Rekombinant Protein Üretimi

Rekombinant DNA teknolojileri alanındaki son gelişmeler, terapötikler, aşılar ve teşhis reaktifleri olarak kullanılabilen rekombinant proteinlerin üretilmesinin yolunu açmıştır.
Rekombinant proteinler, genin ekspresyonunu ve mesajcı RNA (mRNA) ‘nın translasyonunu destekleyen bir ekspresyon vektörüne klonlanmış rekombinant DNA tarafından kodlanan proteinlerdir.

Hücre Hattı Geliştirme
Hücre hattının geliştirilmesinde ilk olarak ilgili genin vektörüne klonlanması, konakçı hücreye transfeksiyon ve havuz seçimi, havuzların analitik karakterizasyonu, tek hücre klon belirleme çalışmaları gerçekleştirilmektedir. Ayrıca, her rekombinant proteinin ekspresyonu ve etkili biyoproseslerin gelişimi için koşullarının optimizasyonu gerçekleştirilmektedir.

Saflaştırma Prosesi

İnsan kullanımına yönelik olarak üretilen terapötik ürünlerin üretilmesindeki saflaştırma süreci de büyük önem taşımaktadır. Geleneksel olarak rekombinant proteinler, santrifüjleme, kromatografi ve membran filtrasyonuna dayalı saflaştırma adımları kullanılarak saflaştırılmaktadır. Bu adımların dışında viral inaktivasyon, memeli hücreleri kullanılarak üretilen rekombinant biyofarmasötikler için de kullanılmaktadır.

Kimyasal ve Biyolojik Karakterizasyon
Farmasötik kullanıma yönelik bir rekombinant proteinin heterojenliğini, safsızlık profilini ve gücünü anlamak için kapsamlı bir kimyasal, fiziksel ve konformasyonel karakterizasyon gereklidir. Kesin amino asit dizisi, moleküler ağırlık, yük değişimleri, glikosilasyon, agregasyon seviyesi ve oksidasyon seviyesinin tümü, bir protein ilacının eksiksiz karakterizasyonunun temel bileşenleridir.
Bu kapsamda, proteinlerin karakterizasyonunda amino asit bileşiminin kantitatif analizi, proteinin peptit haritalaması, glikan analizi, asidik-bazik varyant analizi, boyut dışlama gibi kromotaografik ve spektrofotometrik analizler gerçekleştirilmektedir.